You are using an outdated browser. For a faster, safer browsing experience, upgrade for free today.



  • اختبار تحديد فصيلة الدم

    المعرف: 

    1- المعادل الإنجليزي: Blood Typing

    2- التعریف: يوجد في کريات الدم الحمراء مواد کيميائية يطلق عليها «آنتي جين».

    و تحتوي کريات الدم الحمراء لأشخاص مختلفين علی أنتي جينات مختلفة، و تقوم الکريات البيضاء بتوليد جزيئات يطلق عليها المضادات أو «آنتي بادي». و لتحديد فصيلة دم الشخص يستعان بتراص کريات الدم الحمراء من قبل المضادات ضدّ المستضدات في الكريات الحمراء (1).

    النص:

    استطاعت الجمعية الدولية لنقل الدم (ISBT)، أن تشخّص 30 مستضاداً في الکريات الدم الحمراء، أشهرها ABO و Rh. بقعة الدم الموجودة في مسرح الجريمة تکون على ثلاث حالات هي متخثّرة أو متيبّسة أو مغسولة. و قد تبين بالتجربة أنّ بقع الدم المتيبّسة هي أکثر هذه الحالات شيوعاً في مسرح الجريمة. لون بقعة الدم المتيبّسة تتراوح بين الأحمر و البني. و کلما تقادمت بقعة الدم زاد مال اللون إلى الداکن أکثر فأکثر. و للبرهنة على وجود بقعة الدم و تمييزها عن لون الصدأ أو الشوکولاتة ... إلخ نلجأ إلى تجارب کيميائية عديدة مثل الاستعانة بالفنيل فتالين و لوکومالاشیت الأخضر و البنزيدین حيث يتمّ ذلک بطريقة الغربلة و إحداث نقاط ملونة على أثر التفاعل مع الهيموغلوبين.

    يحظى ذلک النوع من التجارب الذي لا يحتاج إلى خبير و من الممکن لضابط التحقيق إجراؤه في محل الجريمة بأهمية کبيرة، ذلک أنّ تمييز بقعة الدم عن البقع الأخرى في مسرح الجريمة يحول دون إطالة الوقت المخصّص لمتابعة الملف، و يسمح للمحقّقين و المفتّشين باتّخاذ القرارات الصحيحة و رسم الطريق المنطقي في الملف الجنائي. بعد إثبات بقعة الدم و تحديد طبيعة الدم، يأتي دور تحديد فصيلة الدم للبقعة و مقارنتها بفصيلة دم المشتبه به.

    من بين التطبيقات الأخرى لمنظومة فصيلة الدم في العلوم الجنائية دراسة العلاقة بين الأب و الابن و الأم و الابن. على سبيل المثال، رجل فصيلة دمه AB لا يمکن أن ينجب ابناً فصيلة دمه O. کما يتمّ تحديد فصيلة الدم المراق حديثاً بالتراص المباشر أي ترسب کريات الدم الحمراء الحديثة على أثر تفاعل المضادات مع المستضدات في الکريات الحمراء (الشکل رقم 1). و لکن نظراً إلى أنّ کريات الدم الحمراء في بقع الدم الموجودة في مسرح الجريمة تتلاشى و تفقد غشائها، لذا لا يمکن تحديد فصيلة الدم للبقع المتيبّسة بوسيلة التراص المباشر، فيقتضي الأمر حينئذ الاستفادة من أسلوب خاص هو الروغان الامتصاصي (2).

               أسلوب الروغان الامتصاصي :

    تحديد فصيلة الدم الخاصة بالبقع المتيبّسة يتم بطريقة الروغان الامتصاصي عبر وسيلتين الأنبوب و الصفيحة. في أسلوب الصفيحة، يتم تخطيط رقائق ستات سلولوز في ثلاثة أعمدة ثم تلصق عليها الخيوط الملطّخة بدم من مسرح الجريمة. بعد ذلک تضاف مضادات فصائل الدم ( آنتی A و آنتی B و آنتیH ) إليها، ثم توضع في الثلاجة بحرارة 4 درجات مئوية. في المرحلة الثانية، يتم غسل المضادات بمصل فيزيولوجي ثم يضاف إليها فصائل دم معروفة A و B و O، على الخيوط، ثم يفحص ميزان التراص بدرجة 56 درجة مئوية فتحدّد فصيلة الدم المأخوذ من مسرح الجريمة (3).

    في أسلوب الأنبوب يستعمل أنبوب اختبار زجاجي صغير بدلاً من رقائق ستات سلولوز. في مقابل کل عيّنة دم يتم اختيار ثلاثة أنابيب اختبار و توضع في کل أنبوب خمسة ملم من الخيط الملطّخ بالدم، و کما في طريقة تحديد فصيلة الدم على رقائق استات سلولز، تضاف مضادات A و B و H داخل الأنابيب (قطرتان في کل أنبوب)؛ ثم تحفظ 24 ساعة في درجة حرارة 4 مئوية، و تغسل بمصل فيزيولوجي، وبعد تخليته تماماً تضاف في کل أنبوب ثلاث قطرات من دم معلوم، و بعد 20 دقيقة فترة حضانة في درجة حرارة 56 مئوية، توضع الأنابيب لمدة ثلاث دقائق في جهاز الطرد المرکزي و بسرعة 3000 rpm٬ ثم يتمّ التفاعل بين المستضدات والمضادات (التراص) بوضع الأنابيب أمام النور٬ و طبقاً لميزان التراص تُعرف فصيلة دم العيّنات.

    الشکل رقم 1. منظومة فصيلة الدم ABO تبيّن المستضد في كريات الدم الحمراء و المضاد.

               تحديد Rh لبقع الدم :

    كما ذکرنا٬ فإنّ كريات الدم الحمراء في بقع الدم الباقية في مسرح الجريمة٬ تتلاشى و أنّ تحديد Rh في كريات الدم الحمراء بطريقة التراص المباشر غير ممكنة٬ و بدلاً من ذلك يستخدم أسلوب الامتصاص. و فيه يتم اختيار أنابيب صغيرة بقطر 8 ملم بعدد العيّنات المأخوذة من مسرح الجريمة٬ وتضاف إلى كل أنبوب قطرة ضد المصل D و عدّة قطرات مصل فيزيولوجي. يتمّ وضع الأنابيب في حرارة الحضانة لمدة 24 ساعة و بدرجة 37 مئوية. في المرحلة الثانية٬ يتم غسلها بمصل فيزيولوجي و توضع في كل أنبوب قطرة دم معلومة الـ Rh موجبة في محلول 4% آلبومين و لمدة ساعة و نصف بدرجة حرارة 37 مئوية. بعد إخراج الأنابيب من الحضانة نضيف عدّة قطرات آلبومين 30% في كل أنبوب و بالتدريج و نضعها من جديد في درجة حرارة 37 مئوية و لمدة 90 دقيقة.

    بعد ذلك نُخرج الأنابيب من الحضانة و نسكبها على صفيحة المجهر٬ لنلاحظ التراص أو عدمه. في حال ملاحظة التراص٬ فإنّ بقعة الدم تعود لـ Rh الموجبة٬ أما إذا لم نلاحظ تراص فإنّها تعود لـ Rh سالبة.

    إذا تطابقت فصيلة الدم للمشتبه به مع العيّنة المأخوذة من مكان الجريمة٬ فلا ينبغي نسبة العيّنة بشكل قطعي إلى المشتبة به و ذلك نظراً لكثرة فصائل الدم في الجمعية٬ و تنوّع الجينات المبيّنة لها؛ و أنّ ثمّة أفراد آخرين في الجمعية يحملون نفس فصيلة الدم. في هذه الحالات لا بدّ من إجراء اختبار DNA Typing على عيّنة مسرح الجريمة. و لكن إذا كانت فصيلة الدم لعيّنة مسرح الجريمة غير مطابقة لفصيلة الدم المتّهم فإنّه و بالقطع نردّ انتسابها إلى ذلك الفرد.

    كلمات دليلية:

    تحديد فصيلة الدم٬ أسلوب الروغان الامتصاصي٬ التراص٬ فحص الدم.

    المصادر:

    1-      Avent ND (2009). "Large-scale blood group genotyping: clinical implications". Br J Haematol 144 (1): 3–13

    2-      Absorption Elution.

    3-      Spalding, R. P. (2003) Identification and characterization of blood and bloodstains; in Forensic Science: an Introduction to Scientific and Investigative Techniques; James, S. H. and Nordby, J. J. (eds.), pp. 181-201

     

               

     

     

               

     

رأيك